【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹繉W(xué)習(xí)用質(zhì)壁分離法和用活體染色法鑒定細(xì)胞死活

    【實(shí)驗(yàn)原理】活細(xì)胞與死細(xì)胞在性質(zhì)上有許多差別，特別是通透性的變化最為明顯?；罴?xì)胞的原生質(zhì)具有選擇透過性；而死細(xì)胞則為全透性。選擇透過性是質(zhì)壁分離的先決條件。因此能發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞就表示是活的，不能發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞則說明是死的。

    死活細(xì)胞間不僅通透性不同，而pH值等情況也不同，它們對(duì)某些染料的反應(yīng)明顯不同。某些染料能在活細(xì)胞的細(xì)胞液中積累，但不能染活的原生質(zhì)；另一方面，這些染料可使死細(xì)胞的原生質(zhì)染色，但不積累于液泡。所以可根據(jù)某些染料活體染色的情況來鑒定細(xì)胞死活。

    【實(shí)驗(yàn)材料和用具】洋蔥及其它植物材料、酒精燈、顯微鏡、刀片、鑷子、載玻片、蓋玻片、1M蔗糖、0.01%中性紅溶液等。

    【實(shí)驗(yàn)步驟】

    1、用質(zhì)壁分離的方法鑒定細(xì)胞的死活。

    撕洋蔥表皮細(xì)胞滴加IM蔗糖中，在顯微鏡下觀察。細(xì)胞很快發(fā)生質(zhì)壁分離，這就是細(xì)胞活著的證據(jù)。另把制取的同樣制片，用冷凍、加熱、干燥、酒精浸泡等方法將它們的細(xì)胞殺死，然后取代上述活材料，做質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)，結(jié)果看到已死的細(xì)胞不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象。

    用尿素、硝酸鉀、氯化鈣溶液等來代替蔗糖，能快速鑒定細(xì)胞的死活。

    2、用活體染色的方法的鑒定細(xì)胞的死活。

    取洋蔥或其它材料，用鑷子撕下表皮（如表皮不易撕下，也可在水中用鋒利的刀片輕輕刮去多余部分），或用刀片做成切片若干，將表皮或切片浸入中性紅溶液中，放置5-10分鐘最出用清水浸洗后置于載玻片上，加蓋玻片，在顯微鏡下觀察。

    活細(xì)胞一般在液泡內(nèi)染成紅色至紫色，原生質(zhì)不染色，死細(xì)胞常呈橙紅色，原生質(zhì)和細(xì)胞核被染色。撕破的細(xì)胞，只剩細(xì)胞壁時(shí)，呈淡紅色或淡紫色。

    為進(jìn)一步鑒別細(xì)胞的死活，可把玻片上的水溶液吸去，滴一滴1M蔗糖溶液，便可觀察到活細(xì)胞能發(fā)生質(zhì)壁分離，死細(xì)胞及空細(xì)胞都有沒有這種現(xiàn)象。

    可用加熱、冷凍或其它方法殺死植物組織，然后用上面所述方法進(jìn)行處理，比較與活組織有何不同。